食品中亚硝酸盐含量试剂盒

食品中亚硝酸盐含量试剂盒

本试剂盒仅供科研使用 1 食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书 （货号：WS1340F 分光法 48 样） 一、产品简介： 在食品中，亚硝酸盐是肉制品及其他食品加工过程中常用的一种食品添加剂，但是人 体长期摄入亚硝酸盐过量的食品，产生直接毒害和慢性毒害，因此硝酸盐的检测具有特 别重要的意义。 待检样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮 化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，在 540nm 处有特征吸收峰。进而计算得 出亚硝酸盐含量。 二、试剂盒的组成和配制： 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 A1 液体 7mL×1 瓶 4℃保存 提取液 A2 粉体 mg×1 瓶 4℃保存 临用甩几下使粉剂落入底部， 再加 4mL 的蒸馏水充分溶解备 用。 提取液 A3 粉体 mg×1 支 4℃保存 临用甩几下使粉剂落入底部， 先 加 0.12mL 的 乙 酸 ， 再 加 3.88mL 的蒸馏水，溶解备用。 试剂一 粉体 mg×1 瓶 4℃避光保存 临用甩几下使粉剂落入底部， 再加 10mL 的 20%盐酸水溶液 （2mL 盐酸缓慢加入 8mL 蒸馏 水中），充分溶解备用。 试剂二 粉体 mg×1 瓶 4℃避光保存 临用甩几下使粉剂落入底部， 再加 5mL 蒸馏水溶解备用。 标准品 粉体 mg×1 支 4℃保存 三、所需的仪器和用品： 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、蒸馏水、天平、常温离心机、乙酸、 盐酸。 四、食品中亚硝酸盐含量测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！ 1、样本处理 ① 干酪奶酪样本：称取约 0.3g 样本于研钵中，加 1mL 蒸馏水研磨成匀浆后全部转移 至 2mLEP 管中，再加入 0.04mL 的 3%乙酸溶液（0.3mL 冰乙酸缓慢加入 9.7mL 水 中），最后用蒸馏水定容到 2mL。4℃静置 20min 后，除去上层脂肪，12000rpm 室 温离心 10min，取上清液检测。 ② 液体奶制品：0.5mL 样本，加入 0.125mL 提取液 A1，混匀后加入 0.6mL 蒸馏水， 沸水浴 15min，冷却至室温，加入 0.05mL 提取液 A2，混匀后加入 0.05mL 提取液 A3，混匀，用蒸馏水定容到 2mL，室温静置 30min，除去上层脂肪，12000rpm 离心 取上清液检测。 ③ 其他样本：称取约 0.1g 样本（含水量高可取 0.5）于 2mLEP 管中，加入 0.125mL 提 取液 A1，混匀后加入 1.5mL 蒸馏水，组织研磨机破碎或者用研钵磨碎后再全部转 移至 2mLEP 管中；沸水浴 15min，冷却至室温，加入 0.05mL 提取液 A2，混匀后 加入 0.05mL 提取液 A3，混匀，用蒸馏水定容到 2mL，室温静置 30min，除去上层本试剂盒仅供科研使用 2 脂肪，12000rpm 室温离心 10min，取上清液检测。 【注】：若高蛋白样本，提取后上清液依然浑浊，可以减少样本取样量 W，或在提取过程中将提取 液 A2 和 A3 分别增加到 0.1mL（不能超过 0.1mL），蒸馏水相应减少。 2、上机检测： ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。 ② 标准品使用液配制：称取 2mg 标准品至一新 EP 管中，再加 2mL 蒸馏水溶解标准 品即 1mg/mL 的亚*酸钠标准品溶液，再用蒸馏水稀释 1000 倍（1 份母液+999 份 蒸馏水）即 1μg/mL 亚*酸钠标准品使用液。 ③ 在 EP 管中依次加入： 试剂名称（μL） 测定管 空白管 （仅做一次） 标准管 （仅做一次） 样本 665 蒸馏水 665 标品 665 试剂一 140 140 140 混匀，室温（25℃）准确反应 5min 试剂二 70 70 70 混匀，室温（25℃）准确反应 15min，全部转移至 1mL 比色 皿中，立即于 540nm 读取吸光值 A，△A=A 测定- A 空白。 【注】：*低检出限：液体乳是 0.06mg/kg；干酪及其他样本是 1mg/kg。 五、结果计算： 1、液体样本计算公式： 食品中亚硝酸盐含量(以亚*酸钠计)（mg/L）=△A÷(A 标准-A 空白)×C 标×V÷V 样×D =4×△A÷(A 标准-A 空白)×D 2、固体样本计算公式： 食品中亚硝酸盐含量(以亚*酸钠计)（mg/kg）=△A÷(A 标准-A 空白)×C 标×V÷W×D =2×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D V---提取液总体积，2mL； C 标---标准品浓度，1μg/mL 亚*酸钠； V 样---液体样本取样检测体积，0.5mL； D---稀释倍数，未稀释即为 1； W---实际取样质量，g。