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水中氨态氮/铵根离子含量试剂盒,微板法
水中氨态氮/铵根离子含量试剂盒,微板法
本试剂盒仅供科研使用 1 水中铵根离子含量试剂盒说明书 (货号:WS5240W 微板法 96 样) 一、产品简介: 铵根离子含量是评价水质是否受到污染的一个重要指标,铵根离子在水中存在时呈游 离氨或铵盐的状态,两者组成主要取决于水的 PH 值。 本试剂盒采用靛酚蓝比色法,即在高 PH 值环境下,将水中的铵根离子转化成铵盐的 存在形式来进行测定。水中铵根离子在强碱性介质中与*酚和次氯酸钠作用,生成稳定 的水溶性染料靛酚蓝,吸光度与铵根离子含量成正比,其在 625nm 处有特征吸收峰。 二、试剂盒组分与配制: 试剂名称 规格试剂名称 保存要求 备注 试剂一 液体 12mL×1 瓶 4℃保存 试剂二 A:液体 10mL×1 瓶 B:液体 0.2mL×1 支 4℃保存 用前向 A 液中加入 100μL 的 B 液,混 匀后作为试剂二使用。仍旧 4℃保存。 试剂三 液体 2mL×1 支 4℃保存 标准品 液体 1mL×1 支 4℃保存 若重新做标曲,则用到该试剂。 三、所需的仪器和用品: 酶标仪、96 孔板、常温离心机、移液器、蒸馏水、振荡仪。 四、水中铵根离子的测定: 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费! 1、样本制备: 水溶液或液体样本,直接进行检测。若溶液浑浊,12000rpm 常温离心 10min,取 上清液。 2、上机检测: ① 酶标仪预热 30min,设置温度在 25℃,设定波长为 625nm。 ② 所有试剂在使用前均须在室温或 25℃水浴锅中温育 10min。 ③ 在 96 孔板中按照下表依次加入试剂: 【注】:1、若 A 测定值大于 1.5,可对样本用蒸馏水稀释,则稀释倍数 D 带入公式计算。 2、若△A 小于 0.01,可增加样本加样体积 V1(如由 20μL 增至 60μL 或更多,则试剂一 和试剂二分别减少 20μL,保持总体积不变)。则改变后的 V1 带入公式计算。 试剂(μL) 测定管 空白管 样本 20 蒸馏水 20 试剂一 100 100 试剂二 100 100 充分混匀,25℃静置 1h 试剂三 20 20 充分混匀,于 625nm 处测定吸光值,分别记为 A 测定管和 A 空白管,△A=A 测定管-A 空白管。本试剂盒仅供科研使用 2 五、结果计算: 1、标准曲线:y = 4.7044x-0.0063;x 是标准品质量(μg),y 是△A。 2、水中 NH4+含量(μg/mL)=[(△A+0.0063)÷4.7044]÷V1×D =0.22×(△A+0.0063)÷V1×D 3、水中 NH4+ -N 含量(μg/mL)=[(△A+0.0063)÷ 4.7044]÷V1÷18×14×D =0.17×(△A+0.0063)÷V1×D V1---样本加样体积,20μL=0.02mL; D---稀释倍数,未稀释即为 1。 附:标准曲线制作过程: 1 标准品母液(1mg/mL 的氮): 2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 2,4,6, 8,10 μg/mL。也可根据实际样本来调 整标准品浓度。 3 按照测定管操作表加样操作,依据结果制作标准曲线。