DiR染料，DiD，DiO，DiI，DiR和DiS是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，较好浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显：DiI（橙色荧光），DiO（绿色荧光），DiD（红色荧光）和DiR（深红色荧光）这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。

　　DiR染料的使用方法

　　1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS细胞膜染色液制备

　　(1)配置DMSO或EtOH储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5mM。

　　注意：未使用的储存液保存在-20oC，避免反复冻融。

　　(2)工作液制备：用合适的缓冲液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1～5µM的工作液。

　　注意：工作液的终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找好的条件。

　　2.悬浮细胞染色

　　(1)悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。

　　(2)在37℃培养细胞2～20分钟，不同的细胞好的培养时间不同。

　　(3)染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。

　　(4)倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。

　　(5)重复(3)，(4)步骤两次以上。

　　3.粘壁细胞的染色

　　(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

　　(2)从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。

　　(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

　　(4)在37℃培养细胞2～20分钟，不同的细胞好的培养时间不同。

　　(5)吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。

　　以上便是今天关于DiR染料不是一般的染料，要这么使用才正常的全部分享了，希望对大家今后使用本设备能有帮助。